紫外可見(jiàn)分光光度計(jì)，是用來(lái)測(cè)量待測(cè)物質(zhì)對(duì)可見(jiàn)光或紫外光(200～760nm)的吸光度并進(jìn)行定量分析的儀器。一般分為單光束和雙光束兩類(lèi)。

單光束型主要是依賴(lài)單束光進(jìn)行測(cè)量。一束給定波長(zhǎng)的光通過(guò)對(duì)照物，然后再通過(guò)實(shí)際樣品溶液，就能得到吸光結(jié)果。

雙光束型則是通過(guò)一個(gè)斬光輪（mirrored chopper wheel）將一束光分成兩束，分別測(cè)量對(duì)照樣品和實(shí)際樣品。可以最小化光漂移（lamp drift）和減少測(cè)量時(shí)間。一些雙光型光度計(jì)不利用斬光輪，而是利用一種光束分光器來(lái)代替，將一束光分成兩束平行的光然后同時(shí)測(cè)量對(duì)照樣品和目的樣品。因?yàn)樵黾恿藴y(cè)量的速度，所以雙光束分光光度計(jì)在測(cè)量一些溶液隨時(shí)間動(dòng)態(tài)變化的研究中大有用處。

至于單雙光束的紫外可見(jiàn)分光光度計(jì)各有什么優(yōu)缺點(diǎn)，簡(jiǎn)單對(duì)比如下：

1、單光束UV：傳統(tǒng)的紫外，單光源發(fā)射單光束，全程密閉，通過(guò)光柵，照射樣品，最后由光電倍增管監(jiān)測(cè)器檢測(cè)。

缺點(diǎn)：測(cè)完空白再測(cè)試樣品，全波段分析時(shí)間較長(zhǎng)（一般2min）。

 

2、比例雙光束UV：?jiǎn)喂庠磫喂馐?，全程密閉，通過(guò)光柵，加入棱鏡，把光分為兩束，分別照射樣品與空白，再合并光，進(jìn)入光電倍增管檢測(cè)器，通過(guò)差減法計(jì)算結(jié)果。

好處：空白樣品同時(shí)檢測(cè)。

缺點(diǎn)：靈敏度下降，全波段分析時(shí)間較長(zhǎng)。

 

3、雙光束UV：?jiǎn)喂庠磫喂馐?，全程密閉，通過(guò)棱鏡分出兩道光，分別通過(guò)一光柵，分別進(jìn)入各自的光點(diǎn)倍增管檢測(cè)器。

好處：加強(qiáng)靈敏度，同時(shí)測(cè)量空白與樣品。

缺點(diǎn)：全波段分析時(shí)間較長(zhǎng)。

 

4、全波段UV：?jiǎn)喂庠磫喂馐?，樣品與空白暴露在空氣中，照射樣品，開(kāi)始進(jìn)入密閉箱，通過(guò)光柵，進(jìn)入DAD檢測(cè)器。

好處：空白只需要檢測(cè)一次，如果你愿意一輩子檢測(cè)這一次都可以。檢測(cè)樣品不密閉，外界光線對(duì)其無(wú)影響，使用方便且精確。分析任何波段或全波段不到1s。

缺點(diǎn)：貴。